熒光顯微鏡使用注意事項

 熒光顯微鏡是用短波長的光線照射用熒光素染色過的被檢物體，使之受激發(fā)后而產(chǎn)生長波長的熒光，然后觀察。熒光顯微鏡廣泛應用于生物，醫(yī)學等領域。

（1） 熒光顯微鏡一般分為透射和落射式兩種類型。

 a. 透射式：激發(fā)光來自被檢物體的下方，聚光鏡為暗視野聚光鏡，使激發(fā)光不進入物鏡，而使熒光進入物鏡。它在低倍情況下明亮，而高倍則暗，在油浸和調(diào)中時，較難操作，尤以低倍的照明范圍難于確定，但能得到很暗的視野背景。透射式不使用于非透明的被檢物體。

 b.落射式：透射式目前幾乎被淘汰，新型的熒光顯微鏡多為落射式，光源來自被檢物體的上方，在光路中具有分光鏡，所以對透明和不透明的被檢物體都適用。由于物鏡起了聚光鏡的作用，不僅便于操作，而且從低倍到高倍，可以實現(xiàn)整個視場的均勻照明。

（2） 熒光鏡檢術的注意事項

a. 激發(fā)光長時間的照射，會發(fā)生熒光的衰減和淬滅現(xiàn)象，因此盡可能縮短觀察時間，暫時不觀察時，應用擋板遮蓋激發(fā)光。

b. 作油鏡觀察時，應用"無熒光油"。

c. 熒光幾乎都較弱，應在較暗的室內(nèi)進行。

d. 電源最好裝穩(wěn)壓器，否則電壓不穩(wěn)不僅會降低汞燈的壽命，也會影響鏡檢的效果。

  熒光拍攝通常使用制冷CCD，因為制冷CCD可以減少背景噪聲，對低熒光信號采集很有好處，特別是像單分子成像。采集強熒光信號不一定要制冷CCD，可使用黑白相機，彩色相機不適合熒光采集，因為其敏感度低、分辨率也低，除非熒光信號很高，對分辨率要求不高，才適合用彩色相機。

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